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病理技术切片方法

2017-01-11 10:58:23 admin 79

  切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大约在50~100微米左右,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些,粗切致组织全部暴露后,才进行细切。细切至组织块表面均匀一致,无白点后,再把切的蜡片放入温水中。切片时要求用力均匀、柔和,摇速不易过快或过慢。过快会导致切片厚薄不均,机器磨损;过慢会使切片增厚。切片厚度一般为3~5微米。切片的要求是完整、薄、均匀。切下的片膜其大小形状应与组织块一致,切片的不完整,常会将重要病变遗漏,导致误诊、漏诊。在切片放蜡块时,应注意组织包埋的方向,组织的层次,纤维、肌肉等的走向应与切片刀平行,较难切的部分应放在上面,如皮肤的表皮,肿块的包膜,胃肠道的浆膜等,这样可以减少组织的断裂现象。操作切片机时应用力均匀,避免用力过重。对脱钙组织、骨髓,以及已知的钙化组织,应选用固定的刀口,以减少某他部位出现缺口的可能性。在使用毛笔展片时要防止笔丝进入刀口,因为每切到一根笔丝,就会增加一个缺口。切片厚度一般为4~6微米,有人认为:只要Slee切片机刻度标着几个微米,切出来的片子就是几个微米。其实不然,当切片刀不锋利,或切片时速度不匀,或切的较慢时,切的片子都会变厚,只有在切片刀十分锋利、切片匀速的情况下,才能真正保证其厚度。下面是切片时碰到的问题的原因及可能处理的方法:

  (1)组织发脆:一般是脱水、透明、浸蜡时间过长、温度过高,并与组织本身质地也有关,在切片时,边切边用嘴向蜡片吹气,可能会好些。

  (2)切片卷起,可能是刀不锋利,或刀锋在另一面,或刀角度过大,切片太厚等等。

  (3)蜡片弯曲:可能是刀锋不均,切片刀未磨直,切片刀与蜡块不平行。

  (4) 透明、浸蜡时间过长、温度过高,并与组织本身质地也有关。

  (5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蜡块未夹紧,组织太硬,或切片机主轴太向前,或切片机已磨损。

  (6)切片出现裂痕:可能是刀有缺口,石蜡内有杂质,组织内有钙化、骨片或有线结, 也可能会有棉纸纤维等。

  (7)切片不连片,切不下片,切片很厚,或者切片后蜡块发白,内陷:组织脱水不佳。

  补救办法:可先将蜡块溶解,取出组织,放入加热水浴的丙酮内(80℃),30~60分钟,再进行透明浸蜡包埋切片,也许会好一点。平时切片中碰到一些处理不好的标本(组织脱水或者是浸蜡不充分)和难切的蜡块时,在切片时很容易卷起或切出是碎片,出现这样的情况就很难捞片。

  在这里给大家介绍一种方法可以克服这个问题。把载玻片盒子里的隔离纸撕成和蜡块大小的面积(普通的薄纸也可以),粘点水贴在已经修好片的蜡块上,再切,纸片上就已经粘上了你要切的片子了,直接拿出纸片反向放入漂片机内漂平即可,在切片是散片的情况下应注意严格控制水温,不宜太高。有些老师整天就用此法切片。但这也是我一直反对的做法,原因不在于此法的本身,而在于处理问题的一个思路,有的技术员因有了此法,再不考虑如何将脱水不好的组织处理好,反正有办法应付,这样做出来的片子肯定没有脱水好的组织质量好。所以要求将重点放在组织处理上。只要组织全部处理好了,这方法也就没用了。